解析分光光度計儀器組成原理操作方法

儀器組成

分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃

原理

分光光度計采用個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關系如下式：

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度；

I0為入射的單色光強度；

I 為透射的單色光強度；

T 為物質的透射率；

k 為摩爾吸收系數；

L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長；

c 為物質的濃度；

操作方法

1.接通電源，打開儀器開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。

2.將靈敏度開關調至“1"檔（若零點調節(jié)器調不到“0"時，需選用較。）

3.根據所需波長轉動波長選擇鈕。

4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使空白管對準光路。

5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調節(jié)零點調節(jié)器，使讀數盤針向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋，調節(jié)“100"調節(jié)器，使空白管的t=100，針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。

7.比色畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈